HPLC Troubleshooting

1. Lampe im Detektor ist ausgeschaltet oder defekt
2. Verbindungskabel zwischen Detektor und Steuerrechner nicht angeschlossen
3. Kein Fluss des Laufmittels

1. Lampe am Detektor einschalten oder ersetzen
2. Alle Kabel und Anschlüsse überprüfen
3. Vorratsgefäß überprüfen, Pumpe/n starten

1. Falsche Flussrichtung
2. Keine, zu wenig, falsche Probe injiziert
3. Falsche Sensitivität / Wellenlänge des Detektors

1. Pumpen korrekt einstellen und starten
2. Probe oder Probengeber überprüfen
3. Einstellungen am Detektor prüfen

Stark pulsender Fluss des Laufmittels

1. Pumpen überprüfen, eventuell Luftblase im Ventil am Pumpenkopf
2. Pulsationsdämpfer verwenden

Vermutlich Temperatur­schwankungen durch Einstrahlung von außen

1. Die HPLC Säule in Säulenthermostat verlegen
2. HPLC System vor wechselnder Umgebungs­temperatur schützen

Vermutlich elektromagnetische Störung

1. Abgeschirmte Kabel verwenden
2. Stromversorung mit galv. Trennung (USV) verwenden
3. Das komplette HPLC System an anderen Stromkreis anschließen

Luftblasen in der Durchflusszell im Detektor

1. Durchflusszelle spülen bis Luft entfernt wurde
2. Rückdruckrestriktor am Eingang der Durchflusszelle verwenden
3. Lösemittelfilter verwenden und/oder Lösemittel entgasen

1. Der Mischer ist defekt
2. Lampe im Detektor schadhaft
3. Eluentenabsorption zu hoch

1. Mischer überprüfen
2. Lampe ersetzen
3. Eluenten / Wellenlänge ändern

Durchflusszelle im Detektor verschmutzt

Flusszelle mit org. Lösemittel oder 20% HNO₃ spülen

1. Pumpe/n ist/sind ausgeschaltet
2. Luftblase im Ventil am Pumpenkopf
3. Leckage an Anschluss oder Ansaugschlauch defekt
4. Vorratsgefäß leer oder Ansaugschlauch nicht im Laufmittel

1. Pumpe/n überprüfen und einschalten
2. Pumpenkopf spülen und leicht an Ventil klopfen
3. Verbindungen überprüfen / abdichten oder erneuern
4. Eluent nachfüllen, Ansaugschlauch fixieren

1. Ansaugschlauch oder Filter verstopft
2. HPLC Säule oder Fritte zugesetzt
3. Probenaufgabe Ventil oder Probenschleife verstopft
4. Kapillare am Anschluss gequetscht / verschlossen

1. Verstopfung beseitigen, Filter im Ultraschallbad reinigen oder ersetzen
2. Säule spülen und Fritte im Ultraschallbad reinigen oder ersetzen
3. Ventil zerlegen und reinigen, Schleife spülen oder ersetzen
4. Kapillare beschädigte Stelle abschneiden und wieder anschließen

1. Fritte am Säuleneingang oder Säule vestopft
2. Fritte im Mischer verstopft

1. Vorsäule verwenden / ersetzen, eventuell Säule gegenspülen
2. Fritte im Ultraschallbad reinigen oder ersetzen

1. Schadhaftes oder schlecht schaltendes Ventil
2. Probe ist ausgefallen

1. Ventile überprüfen und reinigen
2. Säule bzw. System spülen

1. Luft in der Pumpe oder in der Ansaugleitung zur Pumpe
2. Undichte Leitung zwischen Pumpe und Säule

1. Lösemittel entgasen bzw. mit Helium spülen
2. Verschaubungen der Leitungen festziehen

1. Kein Fluss der mobilen Phase
2. Undichte Flüssigkeits­leitung zwischen Pumpe und Säule

1. System auf lockere Verschraubungen und Vorratbehälter des Eluenten prüfen.
2. Leckage systematisch suchen und beseitigen

1. Verschmutzung am Säuleneingang, Ausfall von Puffersalzen
2. Viskosität der mobilen Phase ist zu hoch
3. Die Partikel des Säulenmaterials sind zu klein

1. Säule ausbauen und mit starkem Lösemittel rückspülen sowie verstopfte Filterelemente und Vorsäule ersetzen. Passt das Laufmittel zur Puffer­konzentration?
2. Lösemittel ändern oder Temperatur der Säule erhöhen
3. HPLC Säule mit größeren Partikeln verwenden (z. Bsp. anstatt 5 µm  8 µm)

Überladung der HPLC Säule

Aufgabe­konzentration verringern oder Säule mit höherer Kapazität verwenden

1. Totvolumen zwischen Injektor und Säule
2. HPLC Säule schadhaft

1. Injektor / Tubing auf Totvolumen prüfen
2. HPLC Säule ersetzen

Zu großes Injektionsvolumen

Kleineres Injektionsvolumen bzw. kleinere Probensschleife am Injektionsventil verwenden

1. Kanalbildung in der Säule
2. Injektor defekt

1. HPLC Säule ersetzen
2. Injektor prüfen und reparieren

1. Leck der Pumpendichtung
2. Überladung der Säule
3. Säule nicht equilibriert

1. Pumpen­dichtungen ersetzen
2. Geringere Proben­konzentration aufgeben
3. 2 bis 3 Säulenvolumina equilibrieren

1. Temperatur­schwankungen der Säule
2. Ventil am Pumpenkopf bzw. Proportionier­ventil defekt

1. Säulenthermostat verwenden
2. Ventile überprüfen / ersetzen

1. Zu niedriges Injektions­volumen
2. Eluent mit höherer Adsorption
3. Verschmutzte Durchflusszelle im Detektor

1. Injektionsvolumen überprüfen
2. Geeigneten (HPLC-grade) Eluenten verwenden
3. Durchflusszelle im Detektor spülen

1. Verschmutztes Injektionsventil
2. Peak aus vorhergehendem Lauf
3. Injektion mit Luft

1. Injektions­ventil spülen
2. Vorhergehenden Lauf länger laufen lassen
3. Injektions­volumen prüfen

1. Probenlösemittel ist verschmutzt
2. Luft in Durchflusszelle im Detektor
3. HPLC Säule ist verschmutzt

1. Probe neu ansetzen
2. Durchflusszelle spülen, Rückdruck­restriktor verwenden
3. HPLC Säule spülen oder ersetzen

Tubing am Ende der Ferrule ist zu lang

1. PEEK Tubing, auf richtige Länge kürzen und wieder montieren
2. Edelstahl Tubing, Tubing inklusive Ferrule abtrennen, Grat entfernen und mit neuer Ferrule montieren

Totvolumen am Tubingende, Raum zwischen Tubingende und dem Anschlussteil, Tubing ist zu kurz

1. PEEK Tubing, auf max. Länge in die gelöste Verschraubung schieben und wieder festziehen.
2. Edelstahl Tubing, Tubing inklusive Ferrule abtrennen, Grat entfernen und mit neuer Ferrule montieren